产品简介:
Seven All-in-one First Strand cDNA Synthesis Kit Ⅱ(with dsDNase) 是一款高效、便捷、可有效减少污染的高质量第一链 cDNA 合成试剂盒,包含 M-MLV Reverse Transcriptase 及其反应 Buffer、RNA 酶抑制剂、dNTPs、Oligo dT 和随机引物等一链 cDNA 合成所需的所有组分,仅需加入 RNA 模板和水即可开始反应。使用该逆转录试剂盒获得的 cDNA 可用于 qPCR、普通 PCR 等实验。RNA 中存在基因组 DNA 污染,如果逆转录前不做去除处理,下游进行 qPCR 反应时基因组 DNA 与cDNA 会同时进行扩增,尤其是引物设计在同一外显子上时。本试剂盒采用 dsDNase 高效去除基因组 DNA污染,区别于常规的 DNase I,dsDNase 能够特异性的消化双链 DNA(dsDNA 以及 DNA 与 RNA 的杂合链),并且具有热敏感性,可在高温条件下快速不可逆地失活。与传统使用 DNase I 去除基因组 DNA 污染的方法相比,dsDNase 无需额外加入 EDTA 进行失活,不仅节省实验时间,而且降低了对逆转录反应的抑制。使用本产品 15 分钟内最长可获得 12kb cDNA。
可依据基因组污染严重程度选择采用去基因组 DNA 污染与逆转录分开进行的操作方法,或者去基因
保存条件:
-20℃保存,有效期 24 个月。
Q1:SM134 逆转录试剂盒的 RNA 模板如何添加?逆转录之后荧光量 cDNA 添加体积如何计算?
A1:本试剂盒建议 RNA 添加量为 Total RNA 50ng~1ug,mRNA 5~100ng;一般建议 Total RNA 加 1ug, 此等条件下 cDNA 浓度为 50ng/uL,一般荧光定量推荐 cDNA 模板添加量 20uL 体系不超过 100ng。即不超 过 2uL。
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点击查看:http://DOI: 10.3892/ijo.2023.5506
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